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這樣操作腫瘤解離試劑盒，即簡單又快速
更新時間：2021-08-26 瀏覽次數(shù)：764
腫瘤解離試劑盒具有高效、快捷、易批量操作等優(yōu)點，不同的廠家提供不同種類，不同類型的腫瘤解離試劑盒產(chǎn)品，為科研用戶帶來方便。
實驗前的準(zhǔn)備工作：
1、準(zhǔn)備好所有實驗額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等；
2、確定試劑盒在有效期內(nèi)；
3、仔細(xì)閱讀說明書；
4、按說明書確定所有試劑齊全；
5、標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備，盡量分裝做備份；
6、根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量；
7、按說明書將所用試劑盒平衡至室溫，配制所需試劑。
腫瘤解離試劑盒的操作步驟：
1、使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差；
2、根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)；
3、加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時；
4、甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次；
5、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘；
6、甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次；
7、每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照；
8、取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果；
9、在450nm波長處測定各孔的OD值。